色譜柱的反沖技術(shù)你了解嗎？

　　色譜柱上基本都有->標(biāo)志，表示流動(dòng)相的流動(dòng)方向，有的在色譜柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字樣，翻譯成“決不能反沖”的意思，色譜柱可以反沖嗎、色譜柱能不能反沖的問題爭議很大，但在我們工作中，用色譜柱反沖技術(shù)修復(fù)色譜柱收到柱效提高、柱效恢復(fù)的效果。
 

　　一、分析氨基酸的離子交換柱，使用一段時(shí)間反柱效明顯下降，用NaOH活化，達(dá)不到要求，但用NaOH反沖活化可迅速恢復(fù)柱效，
 

　　二、色譜柱使用一段時(shí)間后柱效下降，此時(shí)可拆下柱入口端螺帽，去掉1-2mm被污染填料，再用相同填料填滿，然后用流動(dòng)相反沖一下，可使柱效恢復(fù)，因反沖可以改善柱頭死空間。
 

　　三、因反沖可把沉積在過渡板上的細(xì)微顆粒沖走，有時(shí)也可用反沖技術(shù)使柱壓降低。
 

　　一些反沖色譜柱的方法：
 

　　(1)如果是已經(jīng)保存好的色譜柱：1.反向接柱，先用 95 水：5 乙腈 0.2 ml/min，沖 20 倍柱體積；然后用C4H8O，0.2 ml/min，沖 20 倍柱體積；然后用 95 乙腈：5 水，0.2 ml/min，沖 20 倍柱體積；2.正向接柱，用 65乙腈水保存色譜柱。

 

　　(2)如果是剛走完樣的色譜柱，那么請(qǐng)按照下列步驟進(jìn)行：1.卸掉保護(hù)柱2.正向接柱，常規(guī)方法沖洗色譜柱(先 95水，后 95 乙腈或甲醇)；3.反向接柱，先用 95 水：5 乙腈 0.2 ml/min，沖 20 倍柱體積；然后用C4H8O，0.2 ml/min，沖 20 倍柱體積；然后用 95 乙腈：5 水，0.2ml/min，沖 20 倍柱體積；4.正向接柱，用 65乙腈水保存色譜柱。

 

　　注意：1.20 倍柱體積：2504.6mm 大概 80ml 1504.6mm 大概 48ml2.反向接柱時(shí)不要接檢測(cè)器。